Question

下图是单克隆抗体制备过程示意图。请分析并回答问题：

 

（1）制备单克隆抗体常用的动物细胞工程技术有__________和__________。

（2）在制备单克隆抗体过程中，首先要将特定的抗原蛋白注入小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得__________。

（3）在图中HAT培养基上，只有__________细胞才能生长。

（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的____________________特点，又具备经过免疫后的B淋巴细胞的__________的特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和多次__________，就可获得足够数量的能分泌所需特异抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，从__________或小鼠腹水中就可以提取出大量的单克隆抗体。

（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是____________________。（至少写出两点）

Answer

动物细胞培养 动物细胞融合 效应B淋巴细胞（浆细胞） 融合的杂种 无限增殖 只产生一种特异性抗体 筛选 细胞培养液 特异性强、灵敏度高、并可能大量制备

【解析】

制备单克隆抗体的原理：已免疫的B淋巴细胞能产生特定抗体，但在体外培养条件下不能无限增殖；骨髓瘤细胞能无限增殖，但不能产生抗体。B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。但细胞融合时，除了产生杂交瘤细胞，还会产生B淋巴细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，因此需要用特定的选择性培养基来筛选出杂交瘤细胞，并进行克隆化培养和抗体检测，以获得产生特定抗体的杂交瘤细胞，然后通过体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内，最终获得单克隆抗体。

（1）单克隆抗体的制备过程涉及的技术有动物细胞培养和动物细胞融合。

（2）在制备单克隆抗体过程中，首先要将特定的抗原蛋白注入小鼠体内，经过体液免疫过程，使小鼠体内产生特定的效应B淋巴细胞，然后从小鼠脾脏中获得该细胞。

（3）图中HAT培养基属于选择培养基，能从多种融合细胞及未融合的细胞中筛选出杂种细胞，只有融合的杂种细胞才能在该培养基中生长。

（4）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞无限增殖的特点，又具备已免疫的B淋巴细胞的只产生一种特异性抗体的特点。经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需特异抗体的细胞。最后将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，就可以从细胞培养液或小鼠腹水中提取出大量的单克隆抗体。

（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是特异性强、灵敏度高，并可能大量制备。